高效液相色譜儀，作為實驗室里高效又精密的 “分離分析能手”，早已深度融入教學科研、制藥研發(fā)、環(huán)保檢測、食品質(zhì)控、化工分析等多個領(lǐng)域。無論是剛接觸儀器的新手，還是需要規(guī)范操作流程的資深實驗人員，掌握一套標準、細致的操作方法都至關(guān)重要 —— 這不僅能讓實驗結(jié)果更精準，更能守護儀器長期穩(wěn)定運行，延長它的 “工作壽命”。今天，我們就從操作前準備到關(guān)機維護，一步步拆解高效液相色譜儀的完整使用流程。?

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操作前準備：做好 “戰(zhàn)前” 準備，實驗更順暢?

流動相的配制是實驗的基礎(chǔ)，直接影響后續(xù)分析結(jié)果。按照實驗方案要求，我們需要配制甲醇與水比例為 8:2 的混合流動相，同時準備好純甲醇；配制完成后，記得用濾膜仔細過濾，再進行超聲脫氣處理，這樣才能避免雜質(zhì)和氣泡影響后續(xù)檢測，處理好的流動相就可以備用了。?

開機與平衡系統(tǒng)：耐心調(diào)試，為檢測打基礎(chǔ)?

先打開泵的電源，一定要確認壓力上限設(shè)置為 40MPa，這是保障儀器安全運行的關(guān)鍵參數(shù)。?

接著，把泵的過濾頭放入純甲醇中，將流量設(shè)定為 1ml/min，啟動泵開始沖洗，這個過程需要持續(xù) 10-20 分鐘，目的是清潔管路，排出殘留雜質(zhì)；沖洗完成后，將過濾頭切換到之前準備好的甲醇水流動相中，讓泵繼續(xù)運行，讓系統(tǒng)逐漸適應(yīng)流動相。?

隨后打開檢測器電源，把檢測波長設(shè)定為 280nm，完成調(diào)零操作，確保檢測器處于穩(wěn)定的初始狀態(tài)。

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工作站連接與基線穩(wěn)定：確認 “信號通暢”，等待佳狀態(tài)?

啟動 UC-3268 色譜工作站后，留意界面是否出現(xiàn)握手圖標 —— 這個圖標意味著工作站與儀器連接成功，信號傳輸正常。接下來就是耐心觀察基線走勢，只有當基線變得平穩(wěn)，沒有明顯波動時，才說明系統(tǒng)已經(jīng)準備就緒，可以開始進樣了。?

樣品分析操作：精準操作，捕捉每一個色譜峰?

進樣前先再確認一下基線位置，如果發(fā)現(xiàn)基線有偏移，必要時重新進行調(diào)零，保證檢測起點準確。?

將進樣閥輕輕扳至 “LOAD” 位置，緩慢注入標樣；標樣注入后，要迅速將進樣閥轉(zhuǎn)至 “INJECT” 位置，避免樣品泄漏或停留時間過長影響結(jié)果。?

此時工作站會自動開始采集數(shù)據(jù)，我們只需靜靜等待，直到色譜峰完整地出現(xiàn)在界面上，再點擊停止采集即可。?

建立校正曲線：規(guī)范參數(shù)，讓定量更準確?

首先設(shè)置定量參數(shù)：選擇峰面積定量法，搭配外標法，采用 1 點校正的方式，這些參數(shù)的選擇要貼合實驗的定量需求。?

然后填寫組份表：比如分析辣椒素時，要準確輸入組分名稱 “辣椒素”、對應(yīng)的保留時間 5.2 分鐘，以及標準濃度 100%，每一項信息都不能出錯，否則會影響校正結(jié)果。?

后定義校正曲線：找到對應(yīng)的譜圖文件，進行重校正操作，系統(tǒng)會自動生成標準曲線，這條曲線將作為后續(xù)樣品定量分析的重要依據(jù)。?

樣品檢測與數(shù)據(jù)分析：批量檢測也能高效精準?

對待測樣品，重復(fù)之前的進樣步驟即可：注入樣品后，等待完整的色譜峰采集完成，點擊停止；想要查看分析結(jié)果很簡單，直接點擊屏幕上的 “報告” 按鈕，各項檢測數(shù)據(jù)就能清晰呈現(xiàn)。如果需要檢測多個樣品，不用重復(fù)復(fù)雜設(shè)置，只要一次次規(guī)范完成進樣操作就行。?

歷史數(shù)據(jù)查詢：隨時回溯，數(shù)據(jù)管理更便捷?

如果需要查看之前的實驗數(shù)據(jù)，進入工作站的 “再處理” 界面，找到并打開需要的歷史數(shù)據(jù)文件，點擊 “重新計算”，完整的屏幕報告就會立刻顯示，方便我們追溯實驗過程、核對數(shù)據(jù)結(jié)果。

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規(guī)范關(guān)機流程：細致收尾，守護儀器 “健康”?

實驗結(jié)束后，關(guān)機步驟同樣不能馬虎。先關(guān)閉檢測器電源，再停止泵的運行；之后，用純甲醇繼續(xù)沖洗系統(tǒng) 10-20 分鐘，徹底清潔管路內(nèi)殘留的流動相；待系統(tǒng)壓力穩(wěn)定后，再關(guān)閉泵的電源；后，用純甲醇或純凈水仔細清洗進樣閥，為下次使用做好準備。?

表1.操作全流程關(guān)鍵信息表

注意事項：這些細節(jié)，決定實驗與儀器的 “壽命”?

1、每次實驗前，務(wù)必確認流動相已經(jīng)過過濾和脫氣處理，這是避免管路堵塞、保證檢測準確的基礎(chǔ)；?

2、操作儀器時，嚴格按照 40MPa 的壓力上限運行，不要超壓操作，防止損壞泵體和管路；?

3、定期更換流動相，保持系統(tǒng)內(nèi)部清潔，避免殘留物質(zhì)堆積影響儀器性能；?

4、每次使用儀器后，及時記錄使用情況，建立完整的儀器使用檔案，方便后續(xù)維護和問題追溯。?

表2.儀器操作注意事項對照表

表3.不同操作階段常見問題與解決方法表?

掌握這套標準操作流程，不僅能讓你充分發(fā)揮高效液相色譜儀的分析性能，拿到準確可靠的實驗數(shù)據(jù)，更能通過規(guī)范操作延長儀器的使用壽命。要知道，儀器的長期穩(wěn)定運行，離不開每一次細致的操作和用心的維護。

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