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高效液相色譜儀操作工序

更新時間:2025-06-05

高效液相色譜儀廣泛用于教學、科研、中西制藥、農(nóng)藥、環(huán)保、防疫、商檢、食品、飼料、石化、煤炭、染料、精細化工、生物工程等行業(yè)。

高效液相色譜儀操作工序:

一:配置好實驗所需的流動相(甲醇:水=8:2)和純甲醇,經(jīng)過濾超聲后備用。

二:打開泵電源。將泵的壓力上限設置為40MPa。(已設定好,可不用再設定)

1.將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中,設置流量為1ml,然后按“啟動/停止”鍵開始走液,經(jīng)過10-20分鐘后按“啟動/停止”鍵停止走液。

2.將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的甲醇水中,然后按“啟動/停止”鍵開始走液。

3.打開檢測器電源,調(diào)整好檢測器的波長280(已設定好,可不用再設定),然后按“調(diào)零”鍵調(diào)零。

三:打開電腦上的UC-3268色譜工作站,左上方出現(xiàn)握手圖標,說明工作站已連接儀器。然后查看基線等基線走直即可進樣。

四:進樣之前先看基線在不在界面內(nèi),如果不在按“調(diào)零”鍵調(diào)零,之后再開始進標樣,將液體進樣閥扳到“LOAD”位置,將標樣打入液體進樣閥內(nèi),再把液體進樣閥扳到“INJECT”位置,此時工作站已啟動,等峰出完后點“停止”鍵。

五:做校正曲線

1.編輯定量參數(shù)

點擊“定量參數(shù)”圖標,彈出方法編輯窗口:

設置好“定量方式:(峰面積)”、“定量方法(外標法)”、“標準(1個濃度標樣,

選‘1點’”)、“次方(1次)”、“標樣濃度單位(%)”、“樣品結(jié)果單位(%)”。

2.填寫組份表

點擊“組份表”圖標,彈出方法編輯窗口,填入所分析的樣品組份名稱(辣椒素)、保留時間(5.2分鐘左右)及標準濃度(100)。

3.定義校正曲線

點擊“校正曲線”圖標,彈出方法編輯窗口。

定義各點對應的色譜峰文件。即先用鼠標指向標樣點號,然后單擊左鍵,則該點號被藍框覆蓋,再單擊右鍵,彈出右鍵可選菜單:

選擇“增加”項(此項操作即表示同一個濃度點,可以加入幾個平行實驗的數(shù)據(jù)進來進行平均計算),彈出“譜圖選擇”窗口。

然后在此選擇相應的譜圖文件,則該序號點的文件前出現(xiàn)一個“+”號。各個點定義完成后,單擊“重校正”即可顯示出校正曲線。點“確認”鍵。

六:進樣品,出完峰后點停止,點屏幕報告即可查看結(jié)果。如有多個樣品,可重復 進樣品 此步驟即可。

七:查看以前樣品結(jié)果

進入“再處理”界面,點擊“打開數(shù)據(jù)文件”圖標,彈出“譜圖選擇”窗口在此選擇樣品譜圖文件,如下:

然后要單擊“重新計算”按鈕,再點擊“屏幕報告”圖標,即可看到屏幕報告表:

八:關(guān)機

關(guān)閉檢測器電源,按“啟動/停止”鍵停止泵運行,將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中,按“啟動/停止”鍵開始走液,經(jīng)過10-20分鐘,泵壓力穩(wěn)定后,按“啟動/停止”鍵停止走液,關(guān)閉泵電源。電腦不用可提前關(guān)閉。

用純甲醇或純凈水清洗一下液體進樣閥。